Qingjie Fuzheng granules treat ulcerative colitis by regulating Th17/Treg balance（清解扶正颗粒调节Th17/Treg细胞平衡治疗溃疡性结肠炎的作用机制研究）

[摘要] 目的 通过体内实验观察清解扶正颗粒（QFG）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）的抗炎作用，并从辅助性T细胞17/调节性T细胞（Th17/Treg）平衡的角度揭示QFG缓解UC的作用机制，为临床应用QFG治疗UC奠定实验基础。方法 1. 通过DSS诱导建立UC小鼠模型，灌胃给予QFG（1 g/kg）和生理盐水。在第15天对动物进行取样和分析。2. 观察小鼠的一般生长、体重变化、粪便潜血和疾病活动指数（DAI），记录结肠长度。3. HE（苏木素和伊红）染色观察结肠组织病理损伤情况。4. ELISA法（酶联免疫吸附试验）检测小鼠血清中TGF-β（转化生长因子-β）、IFN-γ（干扰素-γ）和IDO1（吲哚胺2,3-双氧酶1）的表达水平。5. 采用Bio-Plex（生物复合体悬液芯片）法测定血清相关细胞因子水平。6. 采用RT-qPCR（实时定量荧光PCR）方法检测小鼠脾脏和结肠组织中相关基因mRNA的表达。7. Western Blot（蛋白质印迹法）法检测RORγt（维甲酸相关孤儿受体γt）和Foxp3（叉状头/翅膀状螺旋转录因子3）在脾脏和结肠中的表达。8. 免疫组化法检测RORγt和Foxp3在脾脏组织中以及IDO1在结肠组织中的表达。结果 1. QFG可改善DSS诱导的UC小鼠的病理状态。2. QFG能显著缓解UC小鼠结肠长度变短，改善结肠组织病理变化，降低IL-1β（白细胞介素-1β）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）、IFN-γ、IL-6细胞因子和IDO1的表达。3. QFG显著降低Th17相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22、IL-25的表达，增加Treg相关细胞因子IL-10、TGF-β的表达。4. QFG可以降低DSS诱导的UC小鼠Th17细胞的转录因子RORγt的表达，升高Treg细胞转录因子Foxp3的表达。结论 1. QFG对DSS诱导的UC小鼠具有改善其体重减轻、降低粪便隐血、降低DAI指数、恢复结肠长度、改善结肠病理损伤的作用，及降低IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IL-6细胞因子水平和IDO1表达的作用，表明QFG对DSS诱导的UC小鼠具有抑制炎症的作用。2. QFG通过调控转录因子RORγt和Foxp3的表达，抑制Th17细胞分化，促进Treg细胞分化，维持Th17/Treg细胞平衡，这可能是QFG抑制小鼠结肠炎症的重要机制之一。

[关键词] 清解扶正颗粒；溃疡性结肠炎；Th17细胞；Treg细胞