Tianhuang formula ameliorates non-alcoholic fatty liver diseases in type 2 diabetic mice through CRLS1-ATF3/ChREBP pathway（田黄方通过CRLS1-ATF3/ChREBP通路改善2型糖尿病小鼠的非酒精性脂肪性肝病）

[摘要] 目的 田黄方（THF）是郭姣教授30年临床经验总结而成的医院方。一些研究表明，它可以缓解体内的血脂异常。本研究旨在证实THF是否能改善高脂饮食（HFD）/链霉素（STZ）诱导的2型糖尿病小鼠的非酒精性脂肪肝（NAFLD），并阐明其潜在机制。方法 在诱导糖尿病后，给小鼠每天一次THF（60mg/kg或120mg/kg），持续10周。通过口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素耐受试验（ITT）测定血糖（FBG）、糖耐量和胰岛素抵抗（IR）。检测血脂、丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）。采用ELISA法测定血清空腹胰岛素（INS）和脂联素（APN）水平。通过H&E染色观察肝和胰岛的组织学变化，然后用油红O染色进行肝脏脂质定量，用碘酸希夫（PAS）染色检测糖原积累。Western印迹检测肝脏中脂肪心磷脂合成酶1（CRLS1）、转录因子激活剂3（ATF3）和碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）的水平。通过RT-qPCR评估肝脏炎症因子、脂肪生成和脂解相关基因的mRNA转录物，以及糖异生酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）、CRLS1、ATF3和ChREBP的mRNA水平。结果 THF分别恢复了受损的糖耐量和胰岛素抵抗。在THF治疗的T2DM小鼠中，HFD/STZ诱导的肝和胰岛损伤、高血清HDL-C和ANP水平得到改善，FBG、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、FFA、INS、ALT和AST以及脂滴计数显著降低。CREBBP结合蛋白ATF3介导胰岛素抵抗信号通路，调节肝脏中的葡萄糖和脂质代谢。THF上调CRLS1，ChREBP下调肝脏中下游ATF3的表达。RT-qPCR分析还系统地表明，THF抑制了与炎症、脂质积聚和糖异生相关的途径和关键调节因子。结论 我们的研究结果表明，THF通过激活CRLS1-ATF3/ChREBP通路改善了T2DM小鼠的脂质状况，减轻了肝脂肪变性。

[关键词] 天黄方；非酒精性脂肪肝；2型糖尿病；CRLS1-ATF3/ChREBP通路