Xiaochaihu decoction induces Bel-7402/5-FU cell apoptosis and autophagy via PI3K/AKT/mTOR pathway（小柴胡汤通过PI3K/AKT/mTOR通路诱导Bel-7402/5-FU细胞凋亡和自噬的研究）

[摘要] 目的 体内外实验观察小柴胡汤对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-FU的抑制作用，探讨其可能的作用机制。方法 培养肝癌亲本细胞Bel-7402及其Bel-7402/5-FU耐药细胞，建立裸鼠移植瘤模型，小柴胡汤干预后，采用MTT实验检测细胞活力，倒置显微镜观察细胞形态变化，流式细胞术和TUNEL染色检测小柴胡汤诱导的细胞凋亡，并检测Bax 和Bcl-2的蛋白表达，Cyto-ID检测小柴胡汤诱导的自噬，进一步检测自噬相关蛋白（LC3, p62和beclin）)的 表达，最后检测PI3K/AKT/mTOR通路。结果 与Bel-7402肝癌亲本细胞相比较，Bel-7402/5-FU细胞对5-FU具有更大的耐药性；小柴胡汤能够抑制Bel-7402/5-FU细胞的活力；进一步研究发现，小柴胡汤能够体内外诱导Bax表达，抑制Bcl-2表达促进Bel-7402/5-FU细胞凋亡；并且能调控自噬相关蛋白表达诱导自噬，小柴胡汤能够阻断PI3K/AKT/mTOR通路。结论 小柴胡汤通过阻断PI3K/AKT/mTOR通路诱导Bel-7402/5-FU细胞凋亡和自噬，这是小柴胡汤逆转肝癌多药耐药的重要机制之一。

[关键词] 小柴胡汤；肝细胞癌；多药耐药；凋亡；自噬；PI3K/AKT/mTOR通路